Рестриктазы [Рестрикционные эндонуклеазы]

Загрузка...

Рестриктаза (от англ. restriction — резать) или эндонуклеаза рестрикции — фермент, разрезающий молекулу ДНК на отрезки по специфической последовательности нуклеотидов.

Если в какую-нибудь клетку микроорганизма извне внедряется чужеродный генетический мате­риал, то он немедленно расщепляется под действием фермента нуклеазы.

Ферменты, разделяющие молекулу ДНК на мелкие части, назы­ваются рестрикционными (разрывающими) эндонуклеазами. Каждая рестриктаза распознает четыре или более пары специфических последовательностей нуклеотидов, связывается с ними и разрывает молекулу ДНК. Отдельные рестриктазы разрезают двойную цепь ДНК на две части подобно ножницам.

Вместе с тем существуют также рестриктазы, которые разрывают двойную цепь молекулы ДНК с образованием «липких» концов. К их числу относятся рестриктазы Eco RI, Bam HI (Эко-эр-один, бам-аш-один), приведённые в таблице. Видно, что эти рестриктазы по своим функциям подобны транспозазам. Поэтому, используя «липкие» концы, образованные этими рестриктазами, легче удаётся соединить отрезки разных ДНК между собой. Благодаря этим свойствам такие рестриктазы широко используются в генной инженерии. К настоящему времени получено в чистом виде и изучено более 500 различных рестриктаз.

Методы выделения высокомолекулярной ДНК из различных организмов в чистом виде, разделения её соответствующей рестриктазой на отрезки с образованием «липких» концов и разделения образовавшихся отрезков методом электрофореза, выбора из различных отрезков тех, которые необходимы, и соединения их между собой с помощью фермента лигазы в заданном порядке являются самыми простыми и основными методами генной инженерии.

Таблица. Отдельные рестриктазы, а также распознаваемые и разрезаемые ими нуклеотидные последовательности

Микроорганизм

Сокращённое название

Нуклеотидная последовательность 5’— 3‘, 3‘— 5‘

Bacillus amulolique faciens H

Bam HI

G‘GATCC Материал с сайта http://wiki-what.com

CCT AG‘G

Escherichia coli RY13

Eco RI

G‘AATTC

CTTAA‘G

Haemophilus aegyptius

Hae III

GG‘CC

CC‘GG
На этой странице материал по темам:

  • Рестриктаза (эндонуклеаза рестрикции)

  • Эндонуклеазами рестрикции

  • Рестриктаза ascl

  • Рестриктаза это

  • Виды рестриктаз

Вопросы к этой статье:

  • Что называют рестриктазами?

  • Как отделяются друг от друга отрезки ДНК?

Материал с сайта http://Wiki-What.com